FACSComp™

Исследование клеток на проточном цитометре включает определение прямого (FSC) и бокового (SSC) светорассеяния, а также эмиссии возбужденных флюорохромов. В цитометре установлены чувствительные фотоэлектронные компоненты с изменяемыми установками усиления. Детекторы SSC , FL 1, FL 2, FL 3 и FL 4 представляют собой фотоумножительные трубки, а детектор FSC – фотодиод. Спектры эмиссии флорохромов перекрываются, поэтому для корректного разделения популяций необходима компенсация данных. Настройки усиления и значения цветовой компенсации могут существенно влиять на качество результатов цитометрического исследования. Настройке этих установок цитометра вручную занимает существенное время, достаточно трудоемка и не исключает риск ошибки оператора. Более достоверны установки полученные в результате автоматической калибровки. Для получения правильных результатов FACSComp использует частицы CalibRITE . Это частицы, с известными значениями рассеяния света и интесивности флуоресценции, используются для определения настроек прибора и оптимизации при подготовке измерений и анализа клеток человека. Наборы CalibRITE включают в себя: немеченные, FITC , PE , PerCP и APC меченные частицы.

FACSComp предлагает три типа калибровок:

  • Lyse / Wash (лизирование с отмывкой) калибровка для работы с лизированным и отмытым образцом (двух-, трех- или четырех-цветная метки);
  • Lyse / No Wash (лизрование без отмывки) калибровка для работы с окрашенным, лизированным и не отмытым образцами (трех- или четырех-цветные метки);
  • HLA - B 27 калибровка для работы с программой HLA - B 27 . FACSComp использует калибровочные частицы HLA - B 27 и модифицирует установки лизирования с отмывкой.

Программа автоматически определяет значения усиления для детекторов, определяет уровень помех и настраивает матрицу компенсаций, так как каждая частица содержит на поверхности только один флюорохром. По окончании процедуры настройки программа FACSComp выводит отчет о состоянии настроек и сравнивает их с предыдущими. При существенном расхождении результатов прибор сообщает о возможных ошибках.

 




Назад в раздел