Реагенты LANCE

Технология LANCE (Lanthanide Chelate Excite) является гомогенным методом анализа, не требующим этапа отмывки. LANCE основана на взаимодействии двух антител, меченных флуорохромами, через перенос энергии, иначе технологии FRET (fluorescence resonance energy transfer). При сближении донора и акцептора на расстояние до 10 нм, происходит возбуждение акцепторного флуорохрома испускаемым светом донора,  в результате анализа детектируется сигнал от молекулы-акцептора.  В технологии LANCE одно из антител  мечено хелатированным европием (возбуждение 340 нм) (рис.1),  а второе – флуоресцентным  красителем, испускающим свет с длиной волны 665 нм. Технология LANCE не требует в ходе протокола анализа добавления стабилизаторов или активирующих агентов, что создает мягкие условия среды для сохранения биологической функцональности.

Для проведения исследований по технологии LANCE необходим микропланшетный ридер с режимом флуоресценции с разрешением во времени (TRF). Длина волны возбуждения 340 нм, регистрируемые длины волн 615 нм и 665 нм.

                               рис.1

Преимущества:

• 1) Чувствительный метод детекции (высокий квантовый выход);
• 2) Регистрация эмиссии в узком спектре (что снижает неспецифическую детекцию фонового свечения образца);
• 3) Гомогенный метод не требует этапа отмывания, принцип «mixing and measuring technology»;
• 4) Длительная стабильность акцепторного флуорохрома;
• 5) Быстрый протокол исследования;
• 6) Небольшой размер акцепторного флуорохрома ULight позволяет напрямую метить пептиды и прочие малые молекулы;
• 7) Применение в широких областях исследований:

Изучение киназ;
Исследования активности GPCR;
Анализ цАФМ;
Анализ взаимодействия рецептора и лиганда;
Исследования протеаз и прочих энзимов;
Анализ белок-белковых взаимодействий;
Анализ взаимодействий белков с нуклеиновыми кислотами;
Большой набор отдельных компонентов LANCE для создания индивидуальных систем детекции биомаркеров.

               Рис.1                       Рис.2                                       Рис.3                                               Рис.4 

1)Добавить анализируемый образец (15 мкл) (рис.1);
2)Добавить антитела, меченые хелатом европия (рис.2) и антитела, меченые Ulight красителем (5 мкл) (рис.3);
3)Проинкубировать в течение часа;
4)Детектировать (рис.4).