Клеточные флуоресцентные красители

Ядра

Мембраны

Наборы Cell Membrane Fluorescence Staining Kit содержат липофильные карбоцианины (DiOC18(3) и DiIC18(3)), которые флуоресцируют при включении в мембраны клеток. После проникания в клеточную мембрану краситель латерально распределяется и постепенно окрашивает всю клеточную мембрану.

iF-WGA представляет собой агглютинин зародыша пшеницы (Wheat Germ Agglutinin), конъюгированный с флуорохромом серии iF. WGA связывается с N-ацетилглюкозамином и N-ацетилнейраминовой кислотой в клеточной мембране. Используются для окрашивания плазматических мембран клеток млекопитающих, синапсов нейронов, мембран грамположительных бактерий и дрожжей, хитина в клеточных стенках грибов. Может быть использован для оценки гипертрофированности кардиомиоцитов.

Цитоскелет

FSD Fluor™ Phalloidin и iF-Phalloidin представляют собой реагенты для детекции нитевидного актина (F-актина), в котором фаллоидин конъюгирован с флуорохромом. Фаллоидин представляет собой жесткий бициклический пептидный токсин, который обычно используется для визуализации в фиксированных формальдегидом и пермеабилизированных срезах тканей, клеточных культурах и бесклеточных экспериментах.

Митохондрии

MitoFlamma® и MitoTracker – флуоресцентные красители для селективного окрашивания митохондрий и оценки их морфологии в живых клетках. Позволяют наблюдать за активностью, локализацией и количеством митохондрий, а также контролировать влияние препаратов или других внешних раздражителей на функцию митохондрий.

Набор JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit представляет собой катионный карбонилцианиновый краситель, который может проходить через клеточную мембрану и агрегировать митохондрии для определения потенциала митохондриальной мембраны. При высоком потенциале эмиссия JC-1 в красном спектре, а при неудовлетворительном состоянии клеток потенциал митохондриальной мембраны уменьшается с эмиссией JC-1 в зеленом спектре.

Лизосомы

Lyso-Tracker (DND-26) – флуоресцентный краситель для селективного окрашивания лизосом в живых клетках. Состоит из флуорохрома и связанных слабых оснований, которые могут свободно проникать в клетки и агрегировать с лизосомами со слабокислой внутренней средой, осуществляя их окрашивание.

ЭПР

ER-Tracker – флуоресцентный краситель для селективного окрашивания и флуоресцентной микроскопической визуализации эндоплазматического ретикулума (ЭПР) в живых клеточных культурах.

Липидные капли

Набор Lipid Droplets Fluorescence Assay Kit предназначен для обнаружения и количественной оценки липидных капель в клетках методом флуоресцентной микроскопии. Содержит специальный флуоресцентный краситель, который селективно окрашивает нейтральные липиды, накапливающиеся в виде липидных капель внутри клеток.

Ангиогенез и солидные опухоли

cRGD, Flamma® — флуоресцентный краситель, используемый для исследования клеточной адгезии и миграции. cRGD (циклический RGD-пептид) специфически связывается с интегринами на поверхности клеток. Позволяет визуализировать и отслеживать процессы ангиогенеза и роста солидных опухолей.

Fucoidan, FSD Fluor™ — флуоресцентный биополимер NIR, в котором Фукоидан (~30 кДа) ковалентно конъюгирован с FSD Fluor ближне-ИК спектра. Фукоидан обладает высоким сродством к P-селектину, имеющему повышенную экспрессию на некоторых видах опухолевых клеток, эндотелии атеросклеротических бляшек и активированных тромбоцитах. Используется для исследования ангиогенеза, атеросклероза, тромбоза и визуализации Р-селектина, визуализации раковых клеток.

Апоптоз

Метод TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP Nick End Labeling) позволяет детектировать фрагментацию ДНК. Метод основан на добавлении маркированных нуклеотидов к 3'-концам разрывов ДНК с использованием фермента терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT). Метод селективнее, более чувствителен к поздним стадиям апоптоза и оптимален для срезов тканей. Наборы Flamma® TUNEL assay kit и Tunel Cell Apoptosis Detection Kit включают dUTP, конъюгированный с флуорохромом.

Метод Annexin V основан на использовании белка Annexin V, который имеет высокое сродство к фосфатидилсерину (липиду, в норме расположенному на внутренней стороне плазматической мембраны). Во время апоптоза фосфатидилсерин перемещается на внешнюю сторону мембраны, где с ним может связаться Annexin V. Метод более чувствителен к ранним стадиям апоптоза и оптимален для живых клеток. Наборы Annexin V Cell Apoptosis Detection Kit включают Annexin V, конъюгированный с флуорохромом, и ядерный краситель для мертвых клеток – PI, DAPI или 7-AAD.

Пролиферация

Метод BrdU предназначен для детекции пролиферации в фиксированных клетках и срезах тканей. BrdU (5-бром-2'-дезоксиуридин, синтетический аналог тимидина) встраивается в ДНК вместо тимидина во время S-фазы клеточного цикла. Требует много времени и сложен в выполнении. Пробоподготовка может отрицательно повлиять на целостность образца, морфологию клеток, качество изображения и способность к окрашиванию другими красителями. Для флуоресцентной визуализации с набором BrdU Detection Kit требуются DAPI и вторичные антитела против мыши, конъюгированные с флуорохромом.

Метод EdU является усовершенствованной версией метода BrdU. EdU (5-этинил-2'-дезоксиуридин, синтетический аналог тимидина) встраивается в ДНК во время синтеза вместо тимидина. Набор Click-iT EdU предназначен для исследования пролиферации не только в фиксированных клетках и срезах тканей, но и в живых клетках. Включает Hoechst 33342 и флуорохром для связывания с EdU.

Жизнеспособность клеток

Calcein AM используется для оценки жизнеспособности клеток. Он проникает в живые клетки, где гидролизуется внутриклеточными эстеразами, которые расщепляют группу ацетоксиметилового эфира (AM), до флуоресцирующего кальцеина с эмиссией флуоресценции в зеленом спектре. Апоптотические и мертвые клетки с поврежденными клеточными мембранами не удерживают кальцин. Метод обеспечивает высокую чувствительность и специфичность, минимальную цитотоксичность и подходит для различных типов клеток.

Набор AO/DAPI Solution предназначен для оценки общего количества и жизнеспособности клеток. Включает ДНК-красители Acridine Orange и DAPI. Акридиновый оранжевый может проникать через мембраны живых и мертвых клеток, в то время как DAPI окрашивает только мертвые клетки.

Ионы

Набор Fluo-4 AM Fluorescent Calcium Ion Detection Kit используется для детекции внутриклеточного кальция (Ca²⁺). Fluo-4 AM проникает в клетки и гидролизуется эстеразами до флуорофора Fluo-4, который флуоресцирует в присутствии Ca²⁺. Используется для исследования кальциевых сигналов и динамики внутри клетки.

Набор MQAE Fluorescent Chloride Ion Detection Kit предназначен для детекции внутриклеточного хлора (Cl⁻). MQAE проникает в клетки и флуоресцирует при связывании с хлорид-ионами. Используется для исследования процессов, связанных с ионными каналами и транспортом Cl⁻.

Набор FerroOrange Fluorescent Method Ferrous lon Detection Kit для быстрого и чувствительного определения ионов Fe2+. FerroOrange (RhoNox-4) при реакции с ионами двухвалентного железа необратимо преобразуется во флуорохром с эмиссией в оранжевом спектре, интенсивность флуоресценции которого пропорциональна содержанию ионов железа в клетке.

Активные формы кислорода

NpFlamma® ROS – реагент для селективного измерения окислительного стресса в живых клетках, который флуоресцирует при окислении перекисью водорода H2O2.

ROS Assay Kit – набор для детекции активных форм кислорода в живых клетках за счет флуоресцентного излучения окисленного DCFH-DA, входящего в состав набора.

Dihydroethidium – реагент для обнаружения супероксидных анионов. DHE свободно проникает в клетку и дегидрируется в присутствии внутриклеточных супероксидных анионов с образованием бромистого этидия, который связывается с внутриклеточными нуклеиновыми кислотами и излучает флуоресцентный сигнал с эмиссией в красном спектре.

Глутатион

FreSHtracer™ Real-Time GSH Assay – реагент для анализа относительного и абсолю тного количества глутатиона (восстанавливает перекись водорода) в живых клетках. Способен беспрепятственно проникать в живые клетки и ее компоненты, связываясь с активной тиоловой группой (-SH) глутатиона, меняя оптические свойства возбуждения/эмиссии с 520/580 нм на 430/510 нм. Применяется для контроля клеточной терапии, исследования стволовых клеток и разработки лекарственных препаратов. Для исследования уровня глутатиона в митохондриях, ЭПР и аппарате Гольджи представлены органоспецифичные наборы.

pH

Набор BCECF, AM Fluorescence pH Assay Kit предназначен для мониторинга динамических изменений внутриклеточного pH в клетках и тканях животных, растительных клетках, бактериях и дрожжах. BCECF, AM при попадании в клетку гидролизуется внутриклеточными эстеразами до флуоресцирующего BCECF. BCECF имеет два пика возбуждения: зависимый (490 нм) и независимый (440 нм) от pH. Чем больше отношение интенсивностей флуоресценции от зависимого к независимому возбуждению, тем выше значение pH.