Капиллярный электрофорез (КЭ) – это альтернативный метод гель-электрофореза, основанный на разделении компонентов анализируемой смеси внутри капилляра, содержащего электролит, под действием электрического тока. В зависимости от своего заряда и молекулярной массы компоненты движутся по капилляру с различной скоростью и, как следствие, достигают детектора через разные промежутки времени и регистрируются в виде пиков на электрофореграмме (рис. 1). Капиллярный электрофорез широко используется в молекулярно-генетических лабораториях различных специализаций для фрагментного анализа нуклеиновых кислот и белков. Метод позволяет получить данные о качественных характеристиках анализируемого образца – размере фрагментов НК или белков и о количественных характеристиках – концентрация данных фрагментов.
Электрофорез проходит в картридже, внутри которого расположен капилляр, заполненный гелем с флуорофором, в капилляре осуществляется разделение компонентов анализируемого образца. Используется несколько типов картриджей для разных типов биомолекул: ДНК, РНК, белков. Каждый картридж рассчитан на проведение 100 – 300 тестов. Устройство и принцип работы картриджа изображены на рис. 2.
Все этапы электрофореза: заливка геля, нанесение образцов, разделение фрагментов, визуализация и анализ полученных результатов - происходят автоматически на одной платформе в одну стадию.
Рисунок 1 – Схема капиллярного гель-электрофореза
Основные компоненты системы капиллярного электрофореза: резервуар с образцом, стартовый и конечный резервуары, заполненные электролитом, капилляр, электроды, высоковольтный источник питания, детектор и устройство вывода и обработки данных.
1. Стартовый резервуар, конечный резервуар и капилляр заполнены электролитом. Для загрузки образца в резервуар, где он находится, помещается капилляр, который затем возвращается в стартовый резервуар.
2. Миграция фрагментов инициируется электрическим полем, которое возникает при подаче напряжения на электроды от источника питания высокого напряжения.
3. Компоненты анализируемой смеси разделяются по мере их миграции из-за их электрофоретической подвижности и обнаруживаются вблизи выхода из капилляра.
4. Результаты, регистрируемые детектором, направляются на устройства вывода данных и обработки. Затем данные отображаются в виде электрофореграммы.
Рисунок 2 – Схема устройства картриджа
А. Общее изображение конструкции картриджа; В. Схема процесса КЭ внутри картриджа.
В системах капиллярного электрофореза BiOptic используются гель-картриджи различных типов для разных биомолекул и задач (например, для высокочувствительного анализа или анализа больших фрагментов НК).
1. Установка необходимого картриджа в анализатор.
2. Подготовка проб для проведения анализа. Загрузка проб и буферов в планшет анализатора.
3. Выбор протокола и проведение электрофореза. Вывод результатов в виде электрофореграммы в режиме реального времени, анализ результатов в ПО.
Приборы BiOptic основанные на использовании технологии капиллярного электрофореза имеют широкий спектр применения и могут производить качественный и количественный анализ образцов.
С этим товаром смотрят
