Проточный цитофлуориметр BD FACSCanto™ II

Описание

Проточный цитометр BD FACSCanto™ II – прибор для полноценного многопараметрического анализа, позволяющий свободно комбинировать до 8 флуоресцентных меток с минимальными ограничениями в выборе сочетаний флуорохромов. Автоматизация процедуры запуска, контроля качества, выключения и плановой промывки обеспечивает простоту эксплуатации.

Специализированное клиническое программное обеспечение FACSCanto™ разработано для автоматизации сбора и анализа данных при проведении клинических исследований.

Регистрационное удостоверение

Оптика

Лазеры

Полупроводниковые лазеры 405 нм (30 мВ) и 488 нм (20 мВ), HeNe лазер 633 нм (17 мВт)

Регистрируемые параметры

До 8 флуоресцентных параметров, до 10 оптических параметров

Проточная кювета

180 × 430 мкм в поперечном сечении

Чувствительность регистрации флуоресценции (MESF)

< 100 эквивалентов FITC, < 50 эквивалентов PE

Разрешение по параметрам светорассеяния

FSC - 1.0 мкм, SSC - 0.5 мкм

Собирающая линза

1.2 N, соединена с проточной кюветой при помощи оптического геля

Детекторы светорассеяния

Детектор FSC: фотодиод, 488/10 BP

Детектор SSC: фотоэлектронный умножитель (ФЭУ), 488/10 BP

Светофильтры

Синий лазер: 530/30; 585/42; >670; 780/60 нм

Красный лазер: 660/20; 780/60 нм

Фиолетовый лазер: 450/50; 510/50 нм

Флуорохромы, регистрируемые от синего лазера

FITC, PE, PerCP or PerCP-Cy™5.5, PE-Cy™7 (525, 575, 678 или 695, 785 нм)

Флуорохромы, регистрируемые от красного лазера

APC, APC-Cy7 (660, 785 нм)

Флуорохромы, регистрируемые от фиолетового лазера

BV421, BV510 (421, 510 нм)

Проточная система

Скорость регистрации событий

10.000 событий в секунду

Скорость потока образца

10-120 мкл/мл

Максимальный размер частицы

50 мкм

Минимальный объём пробы

30 мкл (пробирки BD Falcon™ 12 x 75-mm)

Минимальный объём пробы

Контейнер для проточной жидкости (20 л)

Контейнер для отработанного раствора (10 л)

Контейнер для чистящей жидкости (5 л)

Контейнер для Shutdown-раствора (5 л)

Расход проточной жидкости

1,10 л/ч в рабочем режиме

<1 мл / ч в режиме ожидания

Кроссконтаминация:

≤ 0.1%

Анализ данных

Рабочая станция

HP Z2 Mini G4, на базе процессора Intel Core i7 8700

Операционная система станции

Windows 10 Professional, 64 bit

Программное обеспечение

BD FACSDivaTM v9.0

Модуль для настройки цитометра

CS&T System

Размещение прибора

Габариты

Цитометр: ГхШхВ 61 x 91 x 64 см, вес 145 кг

Стойка для жидкостей: ГхШхВ 61 x 79 x 64 см, вес 51 кг

С установкой BD FACS Loader и HTS глубина цитометра возрастает до 76 см

Источник бесперебойного питания

3000 VA

Опции

Модуль BD™ High Throughput Sampler (HTS) для автоматической подачи проб из планшетов.

Применение

Автоматическая подача образцов из планшетов

Совместимые планшеты

96-луночные и 384-луночные (плоские, круглые и с v-образным дном)

Стандартный режим

≤ 44 минут на 96-луночный планшет

≤ 0,75% кроссконтаминация

Время забора пробы - 10 сек

Режим высокой пропускной способности

≤ 15 минут на 96-луночный планшет

≤ 0,5% кроссконтаминация

Время забора пробы - 2 сек

Модуль BD FACSLoader для автоматической загрузки образцов из пробирок

Применение

Автоматическая подача образцов из пробирок

Установка пробирок

Карусель на 40 пробирок

Производительность

76 пробирок в час

Совместимость с программным обеспечением

Клиническое программное обеспечение BD FACSCanto™

Универсальное программное обеспечение BD FACSDiva ™

Совместимость с оборудованием для пробоподготовки

Станция пробоподготовки BD FACS ™ Sample Prep Assistant III (SPA III)

Станция пробоподготовки BD FACS ™ Lyse Wash Assistant (LWA)

Программы

Программы для обработки цитометрических данных

ModFit LT™

FCAP Array Software

FlowJo™

Анализ данных ДНК – цитометрии

Качественный и количественный анализ растворимых биологических молекул по технологии Cytometric Bead Array (CBA)

Универсальная программа для обработки цитометрических данных

Программные модули для клинического программного оборудования BD FACSCanto™:

BD™ Stem Cell Enumeration Software module

BD™ HLA-B27 Software module

Анализ антигенов стволовых гемопоэтических клеток CD45 и CD34

Обнаружение антигена HLA-B27

Оставить запрос

Оптика

Проточная система

Анализ данных

Опции

Ресурсы

ОПТИКА ВОЗБУЖДЕНИЯ

Конструкция оптической системы включает в себя два или три источника излучения (488 нм, 633 нм, 405 нм (опция).
Пространственное разделение лучей лазеров обеспечивает истинную многопараметровость анализа, позволяя в одном исследовании использовать флуорохромы с близкими спектрами эмиссии, но возбуждаемые на различных длинах волн.
Фиксация всех элементов оптической системы не требует ежедневной юстировки пользователем и обуславливает воспроизводимость результатов от эксперимента к эксперименту.

ОПТИКА РЕГИСТРАЦИИ СИГНАЛА

Кварцевая кювета соединена со светособирающей линзой оптическим гелем, исключающим потерю интенсивности флуоресцентного сигнала.
Флуоресцентный сигнал предается от проточной кюветы к системам детекторов по оптоволокну.
Независимые системы детекторов BD™ Octagon и BD™ Trigon с круговым расположением фотоэлектронных умножителей для регистрации и разделения сигнала индивидуально от каждого лазера позволяют свободно комбинировать различные флуоресцентные метки в многоцветных исследованиях.

Походы, реализованные в конструкции оптической системы прибора, позволяют обеспечить самый высокий в классе уровень флуоресцентной чувствительности.

Регистрируемые
параметры

До 8 параметров флуоресценции,
до 10 оптических параметров.

Чувствительность
регистрации
флуоресценции (MESF)

100 эквивалентов FITC
50 эквивалентов PE

Чувствительность по FSC

1 мкм

Чувствительность по SSC

0,5 мкм

Скорость регистрации событий

10.000 событий в секунду

Максимальный размер детектируемых частиц

50 мкм

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Автоматическая процедура настройки и контроля качества выполняется в программном модуле Cytometer Setup and Tracking™.
По результатам проверки качества создаются графики Леви-Дженнингса, позволяющие контролировать изменение состояния прибора во времени.
Автоматическая корректировка настроек цитометра в соответствии с текущим состоянием прибора,по калибровочным материалам.
Автоматическая оптимизация настроек прибора для работы с отдельными приложениями проточной цитометрии и различными типами образцов.
Обеспечение стабильности и воспроизводимости результатов исследований.
Автоматическая калибровка и настройка всех параметров цитометра (напряжение, компенсация, линейность) для клинических исследований по одной пробирке – в клиническом программном обеспечении FACSCanto.

Полностью автоматизированные протоколы промывки прибора перед включением и выключением системы, управляемые из программного обеспечения дополнительные протоколы промывки прибора.
Автоматическая промывка иглы (SIT Flush) между пробами.
Отдельная стойка для размещения обслуживающих растворов непосредственно в фабричных упаковках.
Дегазация проточной жидкости перед подачей в проточную кювету.
Датчики уровня жидкости во всех емкостях с обслуживающими растворами. Информация об уровне наполнения контейнеров отображается в программном обеспечении.

Скорости подачи образца:

10-120 мкл/мл

Контейнеры для жидкостей

Контейнер для проточной жидкости (20 л)

Контейнер для отработанного раствора (10 л)

Контейнер для обеззараживающего раствора (5 л)

Контейнер для Shutdown-раствора (5 л)

Расход проточной жидкости

1,10 л / ч в рабочем режиме

< 1 мл / ч в режиме ожидания

ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ДЛЯ КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ BD FACSCanto™

Клиническое программное обеспечение BD FACSCanto™ позволяет стандартизировать и автоматизировать сбор и обработку данных при проведении клинических исследований. Встроенный контроль качества позволяет снизить вероятность возникновения ошибки.

Готовые протоколы исследований, включающие логическую последовательность графиков и гейтов, для определения субпопуляционного составав лимфоцитов (T-, B-, NK-лимфоцитов).
Автоматическое создание отчетов с результатами анализа по каждому пациенту.
Встроенный контроль качества каждого результата.

Возможность интеграции дополнительных программных модулей для автоматизации исследований:

Модуль для определения антигена HLA-B27 (BD™ HLA-B27 Software module).
Модуль для определения активационных маркеров CD38 и HLA-DR (BD™ Activation Marker Software module).
Модуль для определения маркеров стволовых гемопоэтических клеток CD45 и CD34 (BD™ Stem Cell Enumeration Software module) по протоколу ISHAGE.

УНИВЕРСАЛЬНОЕ ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ FACSDiva™

Программное обеспечение FACSDiva™ предназначено для сбора и анализа данных, и позволяет проводить гибкую настройку пользовательских протоколов с любыми сочетаниями антител и флуоресцентных красителей.

Построение различных видов графиков (в том числе наложенных гистограмм), гейтов, автоматическое масштабирование гейта на графиках, пакетный анализ и экспорт статистики;
Возможность создания шаблонов протоколов;
Возможность представления статистики в виде иерархии популяций;
Функция автоматического расчета значений компенсации используемых флуорохромов по одноцветным компенсационным контролям;
Модуль CS&T для автоматической настройки и мониторинга работы проточного цитофлуориметра.

Программное обеспечение

BD FACSDivaTM v9.0, BD FACSCanto™

Формат данных

FCS 3.0, 3.1

Рабочая станция

HP Z2 Mini G4, на базе процессора Intel Core i7 8700

Операционная система станции

Windows 10 Professional, 64 bit

Модуль BD™ High Throughput Sampler (HTS) для автоматической подачи проб из планшетов

Совместимость с 96-луночными и 384-луночными планшетами
2 режима работы: стандартный и высокопроизводительный.
≤ 15 минут на 96-луночный планшет
кроссконтаминация ≤0,5% в высокпроизводительном режиме

Модуль Sample temperature control

Автоматическая подача образцов из пробирок.
Встряхивание пробирок для перемешивания образцов.
Загрузка до 40 пробирок одновременно.
Предупреждение в случае неправильной установки пробирки.
Идентификация карусели и пробирок по штрих-коду.
Возможность импорта рабочего списка от BD FACS ™ Sample Prep Assistant.
Совместимость с ПО BD FACSCanto™ и BD FACSDiva™.

Станция BD FACS™ Sample Preparation Assistant III (SPA III)

Автоматизация безотмывочной технологии подготовки проб.
Работа с закрытыми первичными пробирками.
Автоматическое дозирование антител, лизирующего буфера по заданному протоколу.
Безопасность при работе с потенциально инфекционным материалом.
Максимально эффективная работа с применением реагентов BD Multitest™ и BD Tritest™.

Станция BD FACS™ Lyse Wash Assistant (LWA)

Автоматизация протоколов nробоподготовки по отмывочной технологии.
Предварительно запрограммированные и индивидуальные протоколы.
Доступна модель с увеличенным встроенным контейнером для растворов.
Совместимость с FACSLoader
Идеальное решение для онкоrематологических исследований.

Считыватель штрихкодов с подставкой

Автоматизация идентификации пробирок.
Совместимость с ПО BD FACSCanto™ и BD FACSDiva™.

СПЕЦИАЛИЗИРОВАННОЕ ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ

Программные модули для клинического ПО BD FACSCanto:

BD™ Stem Cell Enumeration Software module – модуль разработанный для автоматизированного гейтирования, вычисления статистики и предоставления результатов по выделению жизнеспособных популяций CD45+/CD34+ гемопоэтических стволовых клеток для расчёта дозы при трансплантации.

BD™ HLA-B27 Software module автоматизирует анализ антигена HLA-B27, который имеет клиническое значение для оценки анкилозирующего спондилоартрита, псориаза, реактивного артрита и воспалительных заболеваний кишечника.

Программы для анализа цитометрических данных:

ModFit LT™ - гибкая программа, разработанная для автоматического анализа сложных гистограмм ДНК –цитометрии. Она позволяет определять популяции на стадиях G0/G1, S и G2/M клеточного цикла, анализировать пролиферацию при окрашивании клеток CFSE и т.д. Функции AutoLinearity™, AutoDebris™ и AutoAggregate™ существенно упрощают обработку данных. Программа содержит более 65 редактируемых моделей с возможностью добавления новых и доступна в двух вариантах: ModFit LT v3.3 for PC и ModFit LT v3.3 for Mac OS® X.

FCAP Array Software v3.0.1 - приложение для анализа цитометрических данных по качественному и количественному содержанию растворимых молекул в биологических жидкостях. Доступны ручная настройка ряда параметров и калькулятор стандартного разведения для упрощения ввода данных. Поддерживает возможность анализа до 30-ти молекул. Совместимые форматы импортируемых файлов: FCS 2.0 или 3.0.

FlowJo ^® - универсальная интегрированная среда для анализа и автоматизированной обработки данных проточной цитометрии. Встроенные аналитические платформы для анализа ДНК/клеточного цикла, кинетики, пролиферации, а также инструменты для экспорта необработанных данных для анализа в других программы. Расчет компенсационных матриц с последующим их применением для экспериментальных данных.

Инструкции:

Ресурсы:

Статьи:

1. Внеклеточный АТФ оказывает противоположное действие на активированные и регуляторные CD4 + Т-клетки через активацию пуринергического рецептора P2.
Trabanelli, S. et al. Extracellular ATP exerts opposite effects on activated and regulatory CD4+ T cells via purinergic P2 receptor activation. The Journal of Immunology, 189(3), 2012. doi: 10.4049/jimmunol.1103800

2. Использование красителей LysoTracker: исследование аутофагии методом проточной цитометрии.
Chikte, S. et al. Use of LysoTracker dyes: a flow cytometric study of autophagy. Cytometry Part A, 85(2), 2014. doi: 10.1002/cyto.a.2231

3. Интерлейкин-2 и регуляторные Т-клетки при реакции «трансплантат против хозяина».
Koreth, J.et al. Interleukin-2 and regulatory T cells in graft-versus-host disease. New England Journal of Medicine, 365(22), 2011. doi: 10.1056/NEJMoa1108188

4. Клеточный ответ клеток рака молочной железы человека MCF-7 на воздействие тимохиноном.
Motaghed, M. et al. Cellular responses with thymoquinone treatment in human breast cancer cell line MCF-7. Pharmacognosy research, 5(3), 2013. doi: 10.4103/0974-8490.112428

5. Tim4- и MerTK-опосредованное поглощение апоптотических клеток резидентными перитонеальными макрофагами мыши.
Nishi, C. Tim4-and MerTK-mediated engulfment of apoptotic cells by mouse resident peritoneal macrophages. Molecular and cellular biology, 34(8), 2014. doi: 10.1128/MCB.01394-13

6. Воспалительные состояния определяют влияние мезенхимальных стволовых или стромальных клеток на функцию В-клеток.
Luk, F. et al. Inflammatory conditions dictate the effect of mesenchymal stem or stromal cells on B cell function. Frontiers in Immunology, 8, 2017. doi: 10.3389/fimmu.2017.01042

7. Цитокин-индуцированное связывание иммунного комплекса с высокоаффинным рецептором IgG, FcγRI в присутствии мономерного IgG
Van Der Poel, C.E. et al. Cytokine-induced immune complex binding to the high-affinity IgG receptor, FcγRI, in the presence of monomeric IgG. Blood, 116(24), 2010. doi: 10.1182/blood-2010-04-280214

8. Визуализация свойств стволовых клеток при гепатоцеллюлярной карциноме человека выявляет важность взаимодействия опухоль-хозяин in vivo и предполагаемое направление терапии
Muramatsu, S. et al. Visualization of stem cell features in human hepatocellular carcinoma reveals in vivo significance of tumor‐host interaction and clinical course. Hepatology, 58(1), 2013. doi: 10.1002/hep.26345

9. Прайминг IL-33 регулирует несколько этапов опосредованного нейтрофилами ответа против Candida albicans путем модуляции TLR и Dectin-1 сигналов.
Le, H.T. et al. IL-33 priming regulates multiple steps of the neutrophil-mediated anti-Candida albicans response by modulating TLR and dectin-1 signals. The Journal of Immunology, 189(1), 2012. doi: 10.4049/jimmunol.1103564

10. Ингибирование MEK, отдельно или в сочетании с ингибированием BRAF, влияет на множество функций изолированных нормальных лимфоцитов и дендритных клеток человека.
Vella, L.J. et al. MEK inhibition, alone or in combination with BRAF inhibition, affects multiple functions of isolated normal human lymphocytes and dendritic cells. Cancer immunology research, 2(4), 2014. doi: 10.1158/2326-6066.